Опасность малопродуктивных клеточных очагов заражения ВИЧ

В культуре in vitro растворимый CD4 блокирует инфекцию ВИЧ в Т4-лимфоциты и в моноциты/макрофаги практически на 100%. Однако этот препарат не предотвращает инфицирование таких клеток, например, как перевивная астроглиома U138. На мембране клеток U138 не определяется белок CD4. Не блокирует sCD4 инфицирование и культивируемых мышечных клеток рабдомиосаркомы ТЕ 671, происходящих из поперечно-полосатых мышечных клеток. Результат ожидаемый и показан он в работе Clapham Р.Р. et al. [1989]. Однако тут есть один любопытный факт, показывающий, что для инфицирования чувствительных клеток-мишеней довольно таких малых доз ВИЧ, которые никак не регистрируются современными методами индикации наличия вируса, то есть анализы показывают, что в биоматериале вируса нет, а он есть и реально инфекционен. Клетки астроглиомы U138 и рабдомиосаркомы ТЕ 671 инфицируются по механизму, по-видимому, не опосредованному через CD4. Причем, если для инфицирования астроглиомы требуются большие дозы вируса – в 1000 раз большие, чем для эквивалентного инфицирования Т4-лимфоцитов, то для заражения клеток рабдомиосаркомы достаточно дозы вируса, составляющей всего 0.05 от дозы, необходимой для заражения Т4-лимфоцитов. В клетках обоих типов репликация ВИЧ крайне низка. Например, в супернатанте культуры инфицированных клеток ТЕ 671 стандартными методиками не определяются ни обратная транскритпаза ВИЧ, ни антиген р24 ВИЧ. То есть, как-будто бы вируса в супернатанте нет. Однако если такие клетки с «притаившимся» ВИЧ прокультивировать совместно с клетками Т-лимфоцитарной линии С8166, которые высоко чувствительны к заражению, то клетки С8166 быстро и эффективно заражаются. Это говорит об опасности даже малопродуктивных клеточных очагов заражения ВИЧ в организме.
Опыт по заражению клеток рабдомиосаркомы говорит также о том, что не исключено, что и в организме нормальные поперечно-полосатые мышечные клетки могут инфицироваться ВИЧ. В таком случае это может быть причиной астении, вплоть до кахексии при СПИД.
Несмотря на то, что in vitro растворимый CD4 эффективно блокирует инфекцию ВИЧ, клинические испытания препаратов CD4 in vivo показали его неэффективность в отношении замедления прогрессирования заболевания и его исхода.
Эта неудача побудила к дополнительным исследованиям проблемы. Эти исследования имеют в настоящее время статус эксперимента и не преодолели пока возникшей трудности с блокирующим действием sCD4 in vivo, но лишь создают предпосылки для разработок. Приведем три примера. Первый -создание гибридной рекомбинантной молекулы (fusion-белка), в состав которого входит фрагмент CD4 и Fc-фрагмент тяжелой цепи иммуноглобулина G1 человека [Capon D.F. et al., 1989]. Полученный гибридный белок назвали йммуноадгезином. Цель его получения состояла в объединении свойств CD4 и Fc-IgGl. От Fc-фрагмента хотели получить удлинение времени жизни в крови (для чистого sCD4 время распада составляет 30-120 минут, тогда как у иммуноадгезина от 48 часов до, по расчетам, 21 суток), свойство проникать через плаценту, что, по мнению авторов, должно быть полезно для фармпрепарата.
Показали, что полученный иммуноадгезин в культуре клеток in vitro эффективно блокирует инфекцию ВИЧ в клетки Т-лимфоцитарных линий Н9 и АТН8, а также в промоноциты линии U937. При этом в случае клеток U937, на которых экспрессирован Fc-рецептор, иммуноадгезин не вызывает никакого усиления инфекции, что можно было бы ожидать, если считать верным предположение ряда авторов [Robinson W.E., 1990], что реально существующий феномен усиления вирусной инфекции ВИЧ анти-ВИЧ антителами обязан связыванию комплекса «ВИЧ-анти-ВИЧ антитело» с Fc-рецепторами на клетках.