Опыты Morgan К.A.

Morgan К.A. et al. [1990] трансдуцировали с помощью рекомбинантного ретровирусного вектора N2 ген растворимого фрагмента CD4 в перевивные клетки человека линий A317 и HeLa, а также в клетки мыши SV-T2. Селекцию трансдуцированных клеток проводили на среде с аналогом неомицина С418 (500 мкг/мл). Для облегчения процесса инфицирования клеток-производителей ретровирусным вектором в этой, как и во многих других работах, применяли препарат полибрен (polybrene) в концентрации 8 мкг/мл в течение 2-х часов при 37оС. В этой работе авторы использовали не супернатант с клеток-продуцентов растворимого CD4, а сами клетки как источник, конститутивно и постоянно продуцирующий sCD4. Эти клетки добавляли в культуру клеток Т-лимфоцитарной линии SupTl в соотношении 1:5, соответственно. Клетки SupTl отличаются высокой восприимчивостью к заражению ВИЧ. Опыт показал, что такое со-культивирование действительно защищает клетки SupTl от инфекции ВИЧ при внесении в культуру изолятов вируса ВИЧ-1 RF, а также ВИЧ-1 MN. Этот эксперимент рассматривают как модель одного из вариантов генетической терапии инфекции ВИЧ, а именно создания в организме пула воспроизводящихся клеток, постоянно продуцирующих в достаточном количестве растворимые молекулы CD4, которые будут блокировать возможность инфицирования вирусом СD4-позитивных клеток-мишеней, но не будут оказывать иммуносупрессорного действия, так как не будут мешать взаимодействию клеточного CD4 с антигенами П-го класса ГКГС.
В  описанных  системах  экспрессии  использовали  эукариотические клетки млекопитающих    и   насекомых.    Естественно,    получают рекомбинантный препарат  растворимого  CD4  и  в  традиционном  объекте эксплуатации бактериях Escherichia coli. Но технологические данные этой системы в данном случае не столь хороши. Arthos J. et al.  [1989], например, для индукций экспрессии белка CD4 в бактериях вынуждены были применить наладиксовую кислоту.