Структура акцепторного участка молекулы gp120

Одна их первых работ, руководствующихся этой идеей о консерватизме акцептора, была сделана в 1985г. отечественными исследователями [Игнатьева Г.А. и др., 1988; 1989]. Авторы использовали моноклональное антитело против CD4 – ОКТ4А, конкурирующее с ВИЧ за связывание с CD4, в качестве антигена, против которого получили гибридомные моноклональные анти-идиотипические антитела мыши. При этом исходили еще и из такого представления, что если две биомолекулы специфически реагируют с одной и той же третьей молекулой, то реакционно-способные участки первых двух должны быть если не тождественны, то, по крайней, мере, сильно подобны между собой, то есть в данном конкретном случае активный центр антитела ОКТ4А в антигенном отношении имеет шанс быть подобным акцепторному участку вирусного белка gp120 или, как его еще называют, паратопу.
Отбирали гибридомные антитела, перекрестно-реагирующие как с антителом ОКТ4А, так и с вирусным лизатом ВИЧ-1. По крайней мере два из отобранных моноклональных антител отличаются необычным, не описанным в литературе до нашей работы свойством: они усиливают вирусную инфекцию ВИЧ-1 в культуре С04-позитивных клеток, на которых нет рецептора для Fc-фрагмента иммуноглобулинов. Подробнее мы вернемся к обсуждению этих экспериментов в разделе об иммунопатогенезе инфекционного процесса.
Известно, что паратоп в молекуле gp120 для связывания с CD4 является конформационной структурой. В сыворотках подавляющего большинства людей, инфицированных ВИЧ, присутствуют антитела против белка gp120, которые в тесте in vitro блокируют реакцию gp120 с CD4. Но в тесте Western blot эти блокирующие антитела не реагируют с восстановленным (то есть предобработанным перед электрофорезом додецилсульфатом натрия и, следовательно, с денатурированной вторичной структурой) gp120. Отсюда следует, что паратоп консервативный и конформационный. Следовательно, он не может быть по существу адекватно съимитированным синтетическими пептидами в принятом смысле соответствия последовательности аминокислот в пептиде участку первичной последовательности аминокислот в белке. Опыты по направленному мутагенезу в гене gp120 показали, что для реализации высокоавидного связывания с CD4 наибольшее значение имеет участок молекулы gp120 с аминокислотами NN 365-450 и, кроме того, консервативные фрагменты в 3-ем, 4-ом и 5-ом доменах gp120 [Hemming A. et al., 1989}. Мышиное моноклональное антитело -  "5С2Е5",  про которое известно, что оно направлено к эпитопу с номерами аминокислот NN 420-463 в 4-ом консервативном домене молекулы gp120, частично блокирует связывание gp120 с CD4: на 75% при концентрации антитела 100 мкг/мл. Мы уже писали, что ВИЧ способен инфицировать клетки, не экспрессирующие рецептор CD4. Но, по-видимому, удельный вклад инфекции, опосредованной через рецептор CD4, все-таки существенно выше в типичных случаях, чем инфекции помимо CD4. Кроме того, эта пара "рецептор CD4 -паратоп gp120" высоконсервативна. Эти два факта явились предпосылкой для идеи одного из вариантов генетического лечения СПИД - трансфекции в стволовые кроветворные клетки искусственно модифицированного гена CD4 с делецией свойства связывать ВИЧ и/или обеспечивать его проникновение в клетку, при сохранности свойства специфически взаимодействовать с мономорфными детерминантами антигенов II-го класса главного комплекса гистосовместимости в процессе нормального иммунного ответа. Эту идею впервые высказали отечественные исследователи [Фукс Б.Б. и др., 1988; Игнатьева Г.А. и др., 1988]. Об аналогичных замыслах сообщили также канадские исследователи [New Scientist, 1988, feb. 18, p. 37] и J.Groopman из Гарвардской Медицинской школы в Бостоне [1990].