Исследование заражаемости дендритных клеток различными штаммами ВИЧ

E.Langhoff and E.Tervilliger исследовали заражаемость очищенных дендритных клеток различными штаммами ВИЧ по сравнению с заражаемостью в тех же условиях свежевыделенных из периферической крови нефракционированных лимфоцитов, выделенных CD4+ Т-лимфоцитов и моноцитов. Сначала для заражения  использовали  провирусный  клон  из  изолята  ВИЧ-1   НХВ2, у которого удалили ген nef и на его место вставили ген хлорамфеникол-ацетил-трансферазы как маркер для удобства количественного тестирования инфекции. Результаты показали, что дендритные клетки продуцируют в 30 раз больше ВИЧ, чем CD4+ Т-лимфоциты и в 100 раз больше, чем макрофаги. Продуктивность дендритных клеток по ВИЧ сравнима с продуктивностью технологичной перевивной линии опухолевых клеток Jurkat. Затем дендритные клетки попытались заразить изолятами ВИЧ, известными своей различной клеточной тропностью, а именно IIIВ, тропным к Т-лимфоцитам, и изолятом Ba-L, тропным к моноцитам, и двумя лабораторными рекомбинантными провирусами на основе ДFСI-НТ, не отличающимися избирательностью в тропизме. Результаты показали, что дендритные клетки одинаково хорошо заражаются всеми изолятами и интенсивно продуцируют дочерние вирионы. Методом гибридизации нуклеиновых кислот in situ определяли вирусную РНК в испытуемых культурах клеток. Оказалось, что большое количество вирусной РНК определяется не менее, чем в 80% клеток в культуре дендритных лимфоцитов, и точно также в культуре опухолевых клеток Jurkat. Продуктивность по вирусу у дендритных клеток оказалась таковой, что, расчет показывает, что не менее 80% общего количества вируса, продуцируемого нефракционированными мононуклеарными клетками из периферической крови, продуцируется именно дендритными лимфоцитами, составляющими 1% от общего числа ядросодержащих клеток крови. При этом, еще одно весьма важное наблюдение состоит в том, что интенсивная продукция вируса в дендритных клетках имеет место без сильной пролиферации самих клеток: за три недели культивирования численность дендритных клеток возрастает менее, чем на 15%, тогда как, скажем клетки Jurkat в тех же условиях и за то же время разрастаются до 15-20-кратного увеличения численности. Отсюда следует вывод о том, что для сильной продукции вируса дендритным клеткам не требуется пролиферация.
Третье наблюдение состоит в том, что продукция вируса не сопровождается острой гибелью дендритных клеток. Однако по мере прогрессирования СПИД численность дендритных лимфоцитов в крови и клеток Лангерганса в коже уменьшается [Hofmann Во, 1991].
Четвертое наблюдение состоит в том, что для репликации в дендритных клетках вирусу не требуются все его гены. Вполне хороший уровень репликации имеет место в очищенной культуре дендритных клеток в случае лабораторного штамма провируса delta NRE-HXH-CAT, в котором отсутствуют гены vpu, vpr и nef.
Из приведенных экспериментальных наблюдений следует, что весьма вероятно, что дендритные клетки вносят весомый, если не решающий вклад в естественный патогенез инфекции ВИЧ в организме. Локализуясь в слизистых, они одними из первых инфицируются при сексуальном и аналогичных путях трансмиссии, продуцируют вирус в большом количестве, через циркуляцию доставляют его в лимфоидные органы, где, согласно своей физиологической функции, прицельно преподносят вирус Т-лимфоцитам.
Отметим также еще одну информацию, не относящуюся прямо к дендритным клеткам, и полученную другими авторами, которые исследовали распределение ВИЧ в организме инфицированного человека с целью оценить, насколько репрезентативен диагностический поиск вируса методами цепной полимеразной реакции или гибридизации in situ в клетках периферической крови [Sci.vs AIDS, June 19, 1991]. На значительном клиническом материале они убедились, что количество ВИЧ среди клеток крови составляет не более 10% от количества, локализованного в лимфоидных органах, несущих основной груз вируса в организме (это лимфоузлы, миндалины, аденоиды, то есть все лимфоидные ткани, доступные для прижизненной биопсии). Как показано в другой работе, сильно инфицирована также ткань тимуса [Rossi A. et al., 1990].