Ген vpx – virus protein X

В 1988г. был идентифицирован новый ген, имеющийся у ВИЧ-2 и у SIV, но отсутствующий у ВИЧ-1 [Kappes et al., 1988; Henderson L.E. et al., 1988]. Этот ген, названный первоначально X-orf, является еще одной открытой рамкой считывания в центре генома ВИЧ. Его последовательность перекрывается с 5′-концом гена rev. Кодируемый геном vpx белок имеет молекулярный вес 14 kD у ВИЧ-2 и 12 kD у SIVmac. У ВИЧ-2 он состоит из 112 аминокислот, из которых 94 аминокислоты общие с гомологичным белком SIVmac. Kappes с соавторами [1988] обратили внимание на то, что 10 аминокислот с 5′-конца белка Vpx гомологичны в высокой степени последовательности, имеющейся в ядерном антигене вируса Эпштейн-Барр, а именно: GRG(H/R)G(P/K)GG(W/G)RPG(P/A)P.
Интересно, что белок Vpx составляет по массе более 10% вещества зрелых вирионов ВИЧ-2. В пересчете на моли его количество эквивалентно количеству белков групповых антигенов gag [Henderson L.E. et al., 1988]. To, что этот белок входит в состав зрелых вирионов, отличает его от других регуляторных протеинов вируса. Отличается и методическая история его открытия. Из вирионов SIVmac методом обратно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии выделили белок – р12 – и определили его аминокислотную последовательность.   Она   «на   бумаге»   совпала   с последовательностью, теоретически рассчитанной для невыделенного еще продукта трансляции с уникальной для ВИЧ-2 и SIV открытой рамки считывания X-orf.
В пробирке in vitro этот белок ВИЧ-2, р14, с высокой авидностью связывается с 1-спиральными нуклеиновыми кислотами.
Поскольку «белым пятном» в зрелых вирионах остаются латеральные тельца, то есть неизвестно из чего они состоят, и неизвестно, где локализован в вирионе белок Vpx, составляющий 10% по массе, то, возможно, что латеральные тельца как раз и состоят из Vpx.
Функции Vpx также неизвестны. Но так как этот ген и его продукт уникальны для ВИЧ-2 и отличают его от ВИЧ-1, то представляют рабочий интерес его диагностические возможности. Для их оценки Kappes et al. [1988] получили рекомбинантный fusion-протеин, состоящий из Vpx и белка Е. coli – TrpЕ, а также два синтетических пептида по 19 аминокислот, один из N-конца ВИЧ-2 (MSDPREPIPPGWSGEETI), второй из SIVmac (MIDPRETVPPGNSGEETIG). Рекомбинантный и синтетические антигены использовали для иммунизации кроликов с целью получения антисыворотки, а также в качестве антигенов на твердой фазе для иммуноферментного анализа сывороток инфицированных людей. В этой первой работе испытали реактивность единичных сывороток. Результаты показали, что 2 из 2-х здоровых людей не прореагировали с антигенами Vpx, 4 из 4-х сывороток от пациентов со СПИД/ВИЧ-1 также не прореагировали, две из 4-х сывороток бессимптомных инфицированных ВИЧ-2 показали положительную реакцию.